Salivary Immunoglobulins in Individuals with Common Variable Immunodeficiency.

Oral manifestations of common variable immunodeficiency (CVID) are rare, have rarely been studied and have given controversial results. There are few data about IgA, IgG, and IgM antibody salivary levels in the literature, and there are few papers about the clinical impact of antibody deficiencies and CVID on the oral health of such patients. The aim of this study was to measure serum and salivary IgA, IgG, and IgM levels in CVID participants and controls, and to associate immunoglobulin levels with caries and periodontal disease. This was a case-control study involving 51 CVID individuals and 50 healthy controls. All participants underwent examination for dental caries and periodontal disease. Blood and whole saliva samples were collected on the same day of the oral examination. Serum IgA, IgM, and IgG levels were measured by turbidimetry and salivary IgA, IgM, and IgG titers were assessed by enzyme-linked immunosorbent assay. Incidences of caries and gingivitis were significantly higher in the CVID group than in the control group (p<0.05). Salivary and blood IgA and IgM titers were significantly reduced in the CVID group, but there was no association of salivary immunoglobulin levels with periodontal disease or with caries incidence (p>0.05 for both). Although CVID was associated with increased susceptibility to caries and gingivitis, it was not associated with low salivary levels of IgA and IgM.

Salivary Immunoglobulins in Individuals with Common Variable Immunodeficiency

Abstract Oral manifestations of common variable immunodeficiency (CVID) are rare, have rarely been studied and have given controversial results. There are few data about IgA, IgG, and IgM antibody salivary levels in the literature, and there are few papers about the clinical impact of antibody deficiencies and CVID on the oral health of such patients. The aim of this study was to measure serum and salivary IgA, IgG, and IgM levels in CVID participants and controls, and to associate immunoglobulin levels with caries and periodontal disease. This was a case-control study involving 51 CVID individuals and 50 healthy controls. All participants underwent examination for dental caries and periodontal disease. Blood and whole saliva samples were collected on the same day of the oral examination. Serum IgA, IgM, and IgG levels were measured by turbidimetry and salivary IgA, IgM, and IgG titers were assessed by enzyme-linked immunosorbent assay. Incidences of caries and gingivitis were significantly higher in the CVID group than in the control group (p<0.05). Salivary and blood IgA and IgM titers were significantly reduced in the CVID group, but there was no association of salivary immunoglobulin levels with periodontal disease or with caries incidence (p>0.05 for both). Although CVID was associated with increased susceptibility to caries and gingivitis, it was not associated with low salivary levels of IgA and IgM.

Resumo As manifestações orais em pacientes com imunodeficiência comum variável (ICV) têm sido pouco estudadas e com resultados variados. Há escassos dados na literatura sobre os níveis de IgA, IgG e IgM na saliva, e pouco se sabe sobre o impacto clínico da deficiência destes anticorpos sobre a saúde bucal de pacientes com ICV. O objetivo deste estudo foi medir os níveis séricos e salivares de IgA, IgG e IgM em indivíduos com ICV e controles, e associar os níveis de imunoglobulinas com cárie e doença periodontal. Este foi um estudo de caso-controle, envolvendo 51 indivíduos ICV e 50 controles saudáveis. Todos os participantes foram examinados para cárie e doença periodontal. As amostras de sangue e saliva foram coletadas no mesmo dia do exame intraoral. Os níveis de IgA, IgM e IgG foram medidos por turbidimetria, e os títulos salivares de IgA, IgM e IgG foram avaliados através método imunoenzimático (ELISA). As incidências de cáries e gengivite foram significativamente maiores no grupo ICV do que no grupo controle (p<0,05). Os níveis de IgA e IgM salivares e no sangue foram significativamente reduzidos no grupo ICV, porém não houve associação dos níveis de imunoglobulina salivar com doença periodontal ou com a incidência de cárie (p>0,05 para ambos). Embora ICV foi associado com um aumento da susceptibilidade à cárie e gengivite, não estava associado com baixos níveis salivares de IgA e IgM.

Desenvolvimento de biossensor para detecção do vírus Espetein Barr (EBV) em saliva de pacientes HIV positivos / Biosensor development to detection of Epstein Barr virus (EBV) from positive HIV patients

O vírus Epstein Barr (EBV) é oncogênico e relacionado com a etiologia de inúmeras neoplasias malignas, como linfomas de Burkitt, Hodgkin(LH), não-Hodgkin (LNH), nasal de células NK, além de carcinoma nasofaríngeo, desordens linfoproliferativas, bem como outras lesões não malignas. A incidência de LNH em pacientes HIV positivos é maior em relação a indivíduos saudáveis, sendo 75% desses linfomas, EBV positivos, com alta taxa de DNA e expressão de genes virais. Além disso, aumento da carga viral em pacientes transplantados é preditivo de uma neoplasia maligna associada ao EBV. EBV é facilmente transmitido pela saliva e estudos apontam uma maior quantidade do DNA-EBV em saliva em relação ao sangue. Os métodos clássicos de diagnóstico - Imunoabsorbância (ELlSA); Imunoistoquímica; Reação de Polimerase em Cadeia (PCR); e Hibridização in situ - são realizados em laboratórios bem equipados e por profissionais qualificados, com reagentes específicos e onerosos, e tempo de análise com variação de horas ou até mesmo dias. O desenvolvimento de métodos analíticos rápidos, seguros e de baixo custo para diagnóstico e controle de doenças em humanos tem despertado grande interesse científico através dos biossensores. Simplicidade de utilização e grande sensibilidade nos resultados, diagnóstico em tempo reduzido, uso de pequenas quantidades de amostras e baixo custo, despontam como grandes vantagens para investimento em pesquisa no desenvolvimento dos biossesores, com potencial substituinte de técnicas analíticas tradicionais. Nesse trabalho foi desenvolvido um biossensor para diagnóstico do EBV, isto é, presença ou ausência, em saliva de pacientes HIV positivos. Este sistema foi formado pela imobilização de sequências oligonucleotideos modificados com grupo tiol, complementares ao gene alvo do EBV (EBV-DNA), em nanopartículas de ouro (AuNp) baseado no princípio de detecção colori métrica visual direta. O resultado positivo apresenta mudança de cor da solução do conjugado (AuNp/EBV-DNA) em contato com saliva, e o negativo não mostra mudança de cor sob as mesmas condições. Foi padronizado a partir de amostras de saliva previamente analisadas pela técnica de quantificação absoluta por PCR em Tempo Real. Apresentou linearidade de resposta entre 495.000 e 495 cópias de vírus/uL (R2=0,982), detecção limite de 0,29 cópia/uL e a sensibilidade foi de 0,022 cópias/uL em testes com saliva. Portanto, desenvolvemos um biossensor para diagnóstico do EBV em saliva, de baixo custo, sensível e específico, para ser utilizado em laboratórios, consultórios e/ou ambulatórios, sem a necessidade de equipamento e capacitação profissional para interpretação de resultados.

Epstein Barr (EBV) is an oncogenic vírus that is related to several diferent malignant neoplasms, such as, Burkitl, Hodgkin (HL) and non-Hodgkin (NHL) Iymphomas, nasal NK-cell Iymphoma, besides nasopharyngeal carcinoma, Iymphoproliferative disorders, and other non-neoplastic disorders. NHL is more incident in HIV patients than in healthy individuais, and 75% of these Iymphomas are EBV positive. Also, an increase in the viral load of transplanted patients is considered predictive of an EBV related neoplasm. EBV may be transmitled by the saliva of and infected person, and the literatures shows a higher DNA amount in this fluid than in blood. The classical diagnostic methods: immunoassay (ELlSA); immunohistochemistry; polymerase chain reaction (PCR); and "in situ" hybridization, are performed in well-equipped laboratories, by trained professionals, with specific and expensive reagents. Usually it takes hours or even days to analyze the results. The development of safe, quick and low-cost innovative methods for diagnosis and control of human diseases has challenged scientists, and biosensors are receiving a great deal of focus. Usability, sensitivity, short-term results, low sample amount and low-cost made biosensors a potential substitute for traditional analytical methods. In this work we developed a biosensor for EBV diagnosis, that is, its presence or absence, in HIV patients. The biosensor is based on the immobilization of EBV specific oligonucleotides sequences in gold nanoparticles by a thiol group. The system is based on a colorimetric detection by direct visualization. A positive result shows a change in color when the conjugate (AuNp/EBV-DNA) is in contact with an EBV infected saliva. EBV DNA copies in saliva were analyzed by absolute quantification with real time PCR. Results present linearity between 495000 and 495 copies/ul (R2=0.982), the detection limit was 0.29 copies/uL, and the sensitivity was 0.022 copies/uL. Therefore, a low-cost, sensitive and specific biosensor for salivary EBV diagnosis was developed. The system is possible to be used in laboratories, clinics, medical and dental offices, with no need of special equipment or training to understand the results.